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蛋鸡血清和卵黄中AIV抗体

浏览次数: 日期:2010-11-11

本试验对免疫鸡血清和卵黄中的AIV抗体水平进行了检测,为AIV的监测提供新的途径,为AIV 高免卵黄在生产实践中的应用提供了依据。
1 材料与方法
1.1 疫苗及抗原
AI油乳剂灭苗为市售(H9N2),批号020924;AI AGP抗原及标准阳性血清、AI HI 抗原均购自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。
1.2 实验鸡
未经AI疫苗免疫的120日龄海兰蛋鸡,经AI血清HI及AGP抗体检测均为阴性,隔离饲喂35天后 进行免疫试验。
1.3 免疫接种
将80只实验鸡随机分为2组,每组40只,单笼饲养并编号,第1组免疫接种AI油乳剂灭活疫苗 , 0.5 ml/只;第2组注射生理盐水为对照,0.5 ml/只。
1.4 集蛋及采血
免疫接种后分别于第0、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、31天,在第1组中随机收集 鸡蛋 10枚,并采集相对应的蛋鸡血液;同时,在第2组中随机收集鸡蛋10枚,采集相应的蛋 鸡血液。
1.5 卵黄抗体的提取
用萃取法提取卵黄抗体。将收集的每枚鸡蛋均弃去蛋清,分别吸取5ml蛋黄,加入5ml生理盐 水做 1∶1稀释,然后加入等量氯仿萃取30 min,3 000 r/min离心5 min,吸出水层用于抗体 监测。
1.6 抗体监测
采用β-微量法分别测定血清及卵黄中的AI HI抗体,并采用10 g/L琼脂板分别测定血清及 卵黄中的 AI AGP抗体。
2 结果 
2.1 HI抗体检测
结果见图1。对照组血清与卵黄AIV抗体均为阴性。由图1可见,AI油乳剂灭活疫苗免疫后的 第 5天,血清中即可测出HI抗体,至免疫后第19天,抗体效价达到高峰值;卵黄中的HI抗体于 免疫后第 7天可以测出,然后逐渐上升,至免疫后第19~21天达高峰值,且接近血清的HI抗 体水平,二者差异不显著( P>0.05)。
2.2 AGP抗体检测
结果见表1。对照组血清与卵黄AIV抗体均为阴性。 表 1 免疫后不同时间血清与卵黄中的AIV AGP抗体检测 结果 (略)
由表1可见,蛋鸡免疫AI油乳剂灭活疫苗后第5~7天,血清中即可检出AIV抗体;第9天后,抗 体阳性检出率达 100%(10/10)。卵黄中的AGP抗体可于免疫后的第7~9天检出;第15天时,抗 体阳性检出率达 100%。AGP抗体的消长规律与HI抗体基本一致。

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